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梅里埃VITEK在微量生化鑒定系統(tǒng)中的應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間: 2022-08-25  點(diǎn)擊次數(shù): 1953次
  梅里埃VITEK采用傳統(tǒng)的比色法和快速熒光法。根據(jù)不同類別細(xì)菌的理化性質(zhì)不同,設(shè)計(jì)不同的測試卡,每一張卡包括多項(xiàng)生化反應(yīng)。儀器采用光電比色法測定細(xì)菌因分解底物導(dǎo)致PH值改變或由于細(xì)菌生長利用底物而引起的透光度變化;其熒光法是在測試卡的小孔中加入酶底物,使其與細(xì)菌產(chǎn)生的酶結(jié)合生成熒光物質(zhì)。
 
  細(xì)菌鑒定實(shí)驗(yàn)底物有幾種不同類型,各個(gè)不同品牌的儀器均使用自己的測試卡和相應(yīng)的試劑;以酶為基礎(chǔ)的反應(yīng)底物,包括顯色底物和熒光底物;以微生物生長為基礎(chǔ)的底物是糖類底物和化合物底物,還有混合底物。
 
  梅里埃VITEK通過與各種細(xì)菌發(fā)生氧化、降解及水解反應(yīng),產(chǎn)生顏色的變化或產(chǎn)生熒光物質(zhì),利用顯色和熒光強(qiáng)度的變化。來鑒定細(xì)菌的菌型。儀器會自動選擇底物進(jìn)行分析。
 
  DNA測序進(jìn)行菌種鑒定的結(jié)果比傳統(tǒng)生化鑒定更為直接,鑒定結(jié)果也更為可靠。測序不依賴菌種本身特點(diǎn),對所有菌種均可使用。對于細(xì)菌,對16SrRNA進(jìn)行分析鑒定,對于真菌,對其ITS基因進(jìn)行測序分析。利用特定引物PCR擴(kuò)增未知菌株的16SrRNA基因或者ITS區(qū),并進(jìn)行DNA測序,與GenBank中的已知序列進(jìn)行同源性比較后,判定細(xì)菌種類,將細(xì)菌劃分到屬或種。
 
  微量生化鑒定系統(tǒng),是在傳統(tǒng)生化試驗(yàn)的基礎(chǔ)上加以改進(jìn),將原先用試管進(jìn)行的系列生化反應(yīng),壓縮整合到一組含有供不同生化試驗(yàn)用的脫水底物的小管組合的裝置內(nèi)。試驗(yàn)時(shí)將培養(yǎng)物制成菌懸液,分注于各個(gè)小管內(nèi),并在小管上加上礦物油。然后,用適宜的溫度培養(yǎng)一定時(shí)間。取出觀察各孔的顏色變化(少數(shù)試驗(yàn)須于滴加試劑后判斷)。

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